代谢功能障碍相关脂肪性肝炎(MASH)是代谢功能障碍相关脂肪性肝病(MAFLD)的一种进行形式，可进展为肝硬化和癌症。目前MASH的发病机制仍然知之甚少，浙江大学医学院附属第一医院徐承富、虞朝辉团队联合浙江大学医学院张普民团队在Molecular Therapy (IF 12.1)上发表文章“The Deubiquitinase USP28 Maintains the Expression of PPARγ and Its InactivationProtects Mice from Diet-Induced MASH and Hepatocarcinoma”，发现USP28的失活能降低PPARγ的表达，并显著改善饮食诱导的MAFLD表型，表明USP28是MAFLD的有效治疗靶点。

①基因信息-USP28：泛素特异性肽酶28

实验动物-6-8周雄性C57BL/6小鼠

病毒产品-AAV-TBG-shUSP28，AAV-TBG-shNC

注射方式-尾静脉注射

注射量-1×10¹² , 100μl

 

②基因信息-PPARγ：过氧化物酶增殖物激活受体

实验动物-Usp28 KO小鼠、Usp28 WT小鼠

病毒产品-AAV-TBG-NC，AAV-TBG-PPARγ

注射方式-尾静脉注射

注射量-1×10¹² , 100μl

AAV介导PPARγ在小鼠体内过表达

作者发现USP28的蛋白水平在小鼠MASH（代谢功能障碍相关脂肪性肝炎）模型中显著增加，此外MAFLD（代谢功能障碍相关的脂肪性肝病）患者样本中USP28水平升高，其表达水平与MAFLD活性评分(MAS)呈正相关，并在来自MASH患者的样本中观察到USP28水平升进一步升高。这些发现表明USP28可能有助于MASH的发展。为了确定USP28是否在MASH中发挥作用，将USP28敲除小鼠以及野生型鼠置于诱导MASH的饮食条件下，发现与对照小鼠相比，喂食MCD饮食的USP28^-/-小鼠在血清ALT/AST水平、肝脏TG水平和肝脏羟脯氨酸含量的增加被显著抑制，组织学染色实验表明USP28^-/-小鼠中MASH表型的比野生型对照组更少。由于在USP28基因敲除小鼠对MCD诱导MASH的保护作用可能来自USP28缺陷的全身效应，作者使用AAV-TBG-shUSP28在肝细胞特异性敲低USP28，发现肝脏中USP28敲低也提供了对MASH的保护。机制研究发现，USP28调节饮食诱导MASH的PPAR信号通路。

为了确定在USP28缺陷小鼠对饮食诱导的MASH发育的保护作用是否是由于Pparγ的下调，作者通使用AAV在USP28缺陷小鼠的肝脏中表达PPARγ，并证实外源性Pparγ表达使MCD饮食诱导USP28^-/-小鼠肝脏中的PPARγ达到与对照小鼠相当的水平。与对照小鼠相比，在Pparγ表达的USP28^-/-小鼠中，血清ALT/AST水平、肝脏TG水平和肝脏羟脯氨酸含量增加，肝脏中有更多的单核细胞/巨噬细胞浸润，并恢复了肝脏中PPARγ靶基因的表达。这些结果表明，对由USP28缺乏引起的对MCD饮食诱导MASH的保护作用很可能是由于PPARγ蛋白水平的下调，进一步研究发现USP28的药理学抑制能减轻饮食诱导的MASH。

WD-CCl4模型更能模拟人类MASH，作者在MASH的WD-CCl4模型中验证了USP28的功能。研究发现当喂食西方饮食时，USP28敲除小鼠的体重的增加程度相较于对照减少，这表明USP28缺乏在WD-CCl4模型中具有保护性。此外WD-CCl4小鼠的肝脏中诱导大量肿瘤，并且这些肿瘤由肝细胞癌形成，但USP28基因敲除小鼠中形成的肿瘤比对照组更少，并且肿瘤更小。与先前来自MCD模型的结果一致，WD-CCl4模型数据同样证明USP28对于小鼠中饮食诱导的MASH是必需的，并且是肝细胞癌的肿瘤增强剂，进一步研究发现USP28抑制剂能减轻WD-CCL4诱导的MASH，并防止肿瘤形成。

本研究发现USP28是一种重要的去泛素化酶，在MAFLD的发展过程中调节PPARγ的表达。USP28的失活能降低PPARγ的表达，并显著改善饮食诱导的MAFLD表型。在WD-CCl4的MASH模型中，USP28的失活也可以预防肝癌的发展。这些结果表明USP28是MAFLD的有效治疗靶点。